采用组织培养的方法培育樟树苗木，具有繁殖快、繁殖系数高等优点，尤其在快速繁殖优良品种或无性系等方面具有独特的优势，不仅能实现工厂化方法生产优良香樟，而且能够保持母本的优良特性。我国关于樟树组织培养的研究开展时间较晚，自20世纪90年代以来，江西农业大学等单位才相继开展了樟树的茎段培养和植株再生研究，并取得了良好的结果。

1. 樟树茎段的离体培养和植株再生

（1）外植体选择与消毒：樟树组织培养的外植体可选用茎段、茎尖、腋芽、种子、离体胚、幼叶等，特别是茎段最为常用。分别将其置于适宜培养基中培养，外植体均能产生愈伤组织或再生植株。

外植体消毒的目的是为了保证无菌组织培养的顺利进行。但从不同植物材料及不同部位所取的外植体的特点不同，所用的消毒液的浓度也不同，须进行对比试验研究以达到最佳消毒效果，即既能消灭外植体材料上的病菌，又不损伤或只轻微损伤组织材料，不致影响其外植体的生长。

连芳青等在试验中摸索出樟树外植体的消毒方法。具体过程如下：8月前后取成龄樟树伐根萌条的梢头部分，采集的嫩梢先用洗洁精洗涤后，再用自来水冲洗数次，在无菌的条件下以70%的乙醇浸30s，再用0.1%的氯化汞灭菌7~10min（视材料老嫩而定），无菌水反复冲洗数次，切取0.5cm左右具芽茎段为培养材料。在常规灭菌后，无菌条件下剥去芽鳞，仅保留2小叶和生长点部分的芽为外植体，可使污染率显著下降，最好时可达2%以下（连芳青等，1992）。

（2）培养条件：培养室温度25±1℃，光照强度2000lx，光周期12h/d。外植体接种初期先暗培养7天以减少褐化程度，然后再置正常光照条件下培养。各培养基均添加琼脂5.6g/L，蔗糖20g/L，pH5.8，121℃高压灭菌20min。

（3）腋芽诱导、继代和增殖：连芳青等(1992)的研究结果表明，茎段以MS+0.5~1.0 mg/L 2，4-D+1.0~1.5 mg/L KT对促进樟树腋芽萌动有明显的效果（如图3-10所示）。外植体接入上述培养基中7 d左右，茎段增粗，切口处产生一定量的愈伤组织，腋芽膨大，突出，开始萌动，约30天后，不定芽可伸长至2~3cm，且不定芽茎段基本不分枝，叶完全展开。与茎段相比，芽培养时，不定芽生长相当缓慢，增殖继代培养时的分生能力及生长势弱。

NAA + BA 有利于樟树继代和增殖培养，浓度以NAA0.3mg/L、BA3.0mg/L最为适宜，转接10天后，开始产生丛生芽，25天后将其再次切割分离，转入同样的培养基中，进行继代培养多代，仍保持旺盛的生长势，繁殖率每25天增加6倍左右。研究过程中发现，继代培养的转代期以25~30天为宜。转接14天后，生长逐渐加快，25天以后生长势减弱，超过1个月生长基本停止，不定芽则从顶端开始逐渐向基部变黑，以致死亡。

图1 樟树腋芽诱导

（4）不定芽的诱导生根：将生长健壮、高达2.5cm以上的不定芽从基部切下，转入生根培养基中诱导生根。结果表明，不定芽植入10~13天后，基部开始膨大，并出现根原基突起；25天左右可形成1~3cm长的根，根条粗壮，根数2~3条。以减半的MS基本培养基，附加适宜浓度的IBA，最高生根率可达79%。

（5）再生植株移栽：经短期炼苗后，将生根植株从培养瓶中移出，洗去根部黏附的培养基，栽入营养袋中，淋定根水并加覆盖保湿。10天后逐渐去掉覆盖物，21天后移至苗圃管护。小植株在苗圃中的存活率达95%以上，长势正常，表现良好。

2. 樟树幼叶愈伤组织的诱导及培养

取樟树幼叶，经0.1%升汞消毒，大量无菌水冲洗后，剪成4mm×4mm不带中脉的小块，叶面向上接种到相应培养基中，置室内遮光暗培养，进行愈伤组织的诱导（如图3-11所示）。黄建和闵伟(1993)的研究结果表明，B5培养基比MS培养基更有利于樟树幼叶愈伤组织的生长。接种后3天，大部分叶片即向上隆起，增厚呈绿色透明状。1周后四周逐渐出现白色增厚，继而出现颗粒状愈伤组织并不断增大。在不含2,4-D的培养基中，接种的叶片仅隆起，不呈绿色透明，且此后培养过程中叶片仅增大呈波浪状，但无愈伤组织发生。说明诱导叶片产生愈伤组织，2,4-D是必需的，采用二次通用旋转组合设计试验结果表明，其适宜用量在1.5~2.3mg/L之间，过量的2,4-D对愈伤组织生长有抑制作用。研究结果还表明，单独使用6-BA不能诱导产生愈伤组织，但在与2,4-D配合使用时可以促进愈伤组织生长，其适宜用量在0.8~1.6mg/L之间(黄建,闵炜，1993）。

图2 樟树愈伤组织的诱导与增殖